Amidase (AMD)
Ensaimean:’S e catalaichean bith-eòlasach macromholacileach a th’ annta, ’s e pròtainean a th’ anns a’ mhòr-chuid de na h-enzyman
Amidase:Bidh iad a’ catalachadh hydrolysis diofar amides aliphatic agus aromatach dùthchasach agus cèin le bhith a’ gluasad buidheann acyl gu uisge le bhith a’ dèanamh searbhagan saora agus ammonia. Tha searbhagan hydroxamic agus searbhagan organach eile air an cleachdadh gu farsaing mar dhrogaichean oir tha iad nam pàirtean de fhactaran fàis, antibiotics agus luchd-bacadh tumhair. Faodar na amidases a roinn ann an acylases seòrsa R agus seòrsa S a rèir stereoroghnachd an catalaiche.
A bharrachd air a bhith a’ catalachadh hydrolysis amides, faodaidh amidase cuideachd ath-bheachdan gluasaid acyl a chatalachadh an làthair co-substrates leithid hydroxylamine.
Tha sònrachas eadar-dhealaichte aig amidase le diofar thùsan airson an t-substrate, chan urrainn dha cuid dhiubh ach amides aramatach a hydrolysis, chan urrainn dha cuid dhiubh ach amides aliphatic a hydrolysis, agus bidh cuid a’ hydrolysis α-no ω-amino amides. Chan eil gnìomhachd catalaíseach math aig a’ mhòr-chuid de na h-amines ach airson amides aramatach neo-chuairteach no sìmplidh, ach airson aramatach iom-fhillte, tha amides heterocyclic, gu sònraichte amides le luchd-ionaid ortho, sa chumantas ìosal ann an gnìomhachd (chan eil ach beagan einnseanan a’ nochdadh buaidhean catalaíseach nas fheàrr).
Meacanachd catalaíoch:
| Ensaimean | Còd Bathar | Còd Bathar |
| Pùdar Ensaim | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | seata de 19 amidases, 50 mg gach fear 19 nithean * 50mg / nì, no meud eile |
| Pasgan Sgrìonaidh (SynKit) | ES-AMD-1900 | seata de 19 amidases, 1 mg gach fear 19 nithean * 1mg / nì |
★ Sònrachas àrd-substrate.
★ Taghadh làidir chiral.
★ Èifeachdas tionndaidh àrd.
★ Nas lugha de thoraidhean fo-thoraidh.
★ Cumhaichean ath-bhualadh tlàth.
★ Càirdeil don àrainneachd.
➢ Bu chòir sgrìonadh einsíme a dhèanamh airson fo-stratan sònraichte air sgàth sònrachas an t-substrate, agus einsím fhaighinn a bhios a’ catalachadh an t-substrate targaid leis a’ bhuaidh catalaíoch as fheàrr.
➢ Na cuir conaltradh ri suidheachaidhean anabarrach leithid: teòthachd àrd, pH àrd/ìosal agus fuasglaiche organach le dùmhlachd àrd.
➢ Mar as trice, bu chòir don t-siostam ath-bhualaidh a bhith a’ toirt a-steach fo-strat, fuasgladh bufair (pH ath-bhualaidh as fheàrr an einnsein). Bu chòir co-fho-stratan leithid hydroxylamine a bhith an làthair ann an siostam ath-bhualaidh gluasaid acyl.
➢ Bu chòir AMD a chur ris mu dheireadh a-steach don t-siostam ath-bhualadh leis a’ pH agus an teòthachd ath-bhualadh as fheàrr.
➢ Tha diofar shuidheachaidhean freagairt as fheàrr aig gach seòrsa AMD, agus mar sin bu chòir sgrùdadh nas mionaidiche a dhèanamh air gach aon dhiubh leotha fhèin.
Eisimpleir 1(1):
Gnìomhachd hydrolysis gu diofar fo-stratan amide
| Fo-strat | Gnìomhachd shònraichte μmols min-1mg-1 | Fo-strat | Gnìomhachd shònraichte μmols min-1mg-1 |
| Acetamide | 3.8 | ο-OH beinsaimide | 1.4 |
| Propionamide | 3.9 | p-OH beinsaimide | 1.2 |
| Lactamide | 12.8 | ο-NH2beinsaimid | 1.0 |
| Butyramide | 11.9 | p-NH2beinsaimid | 0.8 |
| Isobutyramide | 26.2 | ο-Toluamide | 0.3 |
| Pentanamide | 22.0 | p-Toluamide | 8.1 |
| Heacsanamide | 6.4 | Nicotinamide | 1.7 |
| Ciclohexanamide | 19.5 | Isonicotinamide | 1.8 |
| Acrilamide | 10.2 | Picolinamide | 2.1 |
| Meata-acrilamide | 3.5 | 3-Phenylpropionamide | 7.6 |
| Prolinamide | 3.4 | Indol-3-acetamide | 1.9 |
| Beinsamid | 6.8 |
Chaidh an ath-bhualadh a dhèanamh ann am fuasgladh bufair sodium fosfáit 50mM, pH 7.5, aig 70 ℃.
| Amidean | Hiodrocsailàimín | Hiodrasain |
| Acetamide | 8.4 | 1.4 |
| Propionamide | 18.4 | 3.0 |
| Isobutyramide | 25.0 | 22.7 |
| Beinsamid | 9.2 | 6.1 |
Chaidh an ath-bhualadh a dhèanamh ann am fuasgladh bufair sodium fosfáit 50mM, pH 7.5, aig 70 ℃.
Dùmhlachd ath-ghnìomhaiche co-cheangailte: amidean, 100 mM (benzamide, 10 mM); hydroxylamine agus hydrazine, 400 mM; enzyme 0.9 μM.
Eisimpleir 2(2):
Eisimpleir 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al. Extremophiles, 2001, 5: 183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR, et al. Bith-cheimigeachd Phròiseas, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM, et al. Ceimigeachd Bith-organach, 2017, Ri fhaighinn air-loidhne 7.
