Amidase (AMD)
Enzymes:A bheil iad nan catalysts bith-eòlasach macromolecular, is e pròtanan a th’ anns a’ mhòr-chuid de enzymes
Amidas:Dèan catalachadh air hydrolysis de dhiofar amides alifhatic agus cùbhraidh taobh a-muigh agus cèin le bhith a’ gluasad buidheann acyl gu uisge le cinneasachadh searbhagan an-asgaidh agus ammonia.Bithear a’ cleachdadh searbhagan hydroxamic agus searbhagan organach eile gu farsaing mar dhrogaichean leis gu bheil iad nam pàirt de fhactaran fàis, antibiotaicean agus luchd-dìon tumhair.Faodar na h-amidases a roinn ann an acylasan seòrsa R agus seòrsa S a rèir an stereoselectivity catalyst.
A bharrachd air a bhith a’ catalachadh hydrolysis amides, faodaidh amidase cuideachd ath-bheachdan gluasad acyl a chatalachadh an làthair co-substrates leithid hydroxylamine.
Tha sònrachas substrate eadar-dhealaichte aig Amidase le diofar stòran, chan urrainn dha cuid dhiubh ach amides cùbhraidh a hydrolyze, chan urrainn dha cuid dhiubh ach amides aliphatic a hydrolyze, agus cuid dhiubh hydrolyze α-no ω-amino amides.Tha gnìomhachd catalytach math aig a’ mhòr-chuid de na h-amines a-mhàin airson amides cùbhraidh acyclic no sìmplidh, ach airson aromatics iom-fhillte, tha amides heterocyclic, gu sònraichte amides le luchd-àiteachaidh ortho, sa chumantas ìosal ann an gnìomhachd (chan eil ach beagan enzyman a’ nochdadh buaidhean catalytic nas fheàrr).
Inneal catalytach:
| Einnseanan | Còd Bathar | Còd Bathar |
| Pùdar Enzyme | ES-AMD-101 ~ ES-AMD-119 | seata de 19 amidases, 50 mg gach 19 rud * 50mg / item, no meud eile |
| Uidheam sgrìonaidh (SynKit) | ES-AMD-1900 | seata de 19 amidases, 1 mg gach 19 nithean * 1mg / item |
★ Sònraichte substrate àrd.
★ Taghadh chiral làidir.
★ Àrd èifeachdas tionndaidh.
★ Nas lugha fo-stuthan.
★ Suidheachadh freagairt tlàth.
★ Càirdeil don àrainneachd.
➢ Bu chòir sgrìonadh enzyme a dhèanamh airson fo-stratan sònraichte air sgàth sònrachas an t-substrate, agus enzyme fhaighinn a bhios a’ catalachadh an fho-strat targaid leis a’ bhuaidh catalytach as fheàrr.
➢ Na cuir fios gu bràth le fìor dhroch shuidheachaidhean leithid: teòthachd àrd, pH àrd/ìosal agus fuasgladh organach le dùmhlachd àrd.
➢ Mar as trice, bu chòir don t-siostam ath-bhualadh a bhith a’ toirt a-steach fo-fhilleadh, fuasgladh bufair (Am pH freagairt as fheàrr de enzyme).Bu chòir co-substrates leithid hydroxylamine a bhith an làthair ann an siostam freagairt gluasad acyl.
➢ Bu chòir AMD a chuir mu dheireadh a-steach don t-siostam ath-bhualadh leis an ath-bhualadh as fheàrr pH agus teòthachd.
➢ Tha diofar shuidheachaidhean freagairt as fheàrr aig a h-uile seòrsa AMD, agus mar sin bu chòir tuilleadh sgrùdaidh a dhèanamh air gach fear dhiubh leotha fhèin.
Eisimpleir 1(1):
Gnìomh hydrolysis gu diofar substrates Amide
| Fo-strat | Gnìomh sònraichte μmols min-1mg-1 | Fo-strat | Gnìomh sònraichte μmols min-1mg-1 |
| Acetamide | 3.8 | ο-OH benzamide | 1.4 |
| Propionamide | 3.9 | p-OH benzamide | 1.2 |
| Lactamide | 12.8 | ο-NH2beansamide | 1.0 |
| Butyramide | 11.9 | p-NH2beansamide | 0.8 |
| Isobutyramide | 26.2 | ο-Toluamide | 0.3 |
| Pentanamide | 22.0 | p-Toluamide | 8.1 |
| Hexanamide | 6.4 | Nicotanamide | 1.7 |
| Cyclohexanamide | 19.5 | Isonicotinamid | 1.8 |
| Acrylamide | 10.2 | Picolamide | 2.1 |
| Metacrylamide | 3.5 | 3-Phenylpropionamide | 7.6 |
| Prolinamide | 3.4 | Indol-3-acetamide | 1.9 |
| Benzamide | 6.8 |
Chaidh an ath-bhualadh a dhèanamh ann am fuasgladh bufair sodium phosphate 50mM, pH 7.5, aig 70 ℃.
| Amides | Hydroxylamine | Hydrasain |
| Acetamide | 8.4 | 1.4 |
| Propionamide | 18.4 | 3.0 |
| Isobutyramide | 25.0 | 22.7 |
| Benzamide | 9.2 | 6.1 |
Chaidh an ath-bhualadh a dhèanamh ann am fuasgladh bufair sodium phosphate 50mM, pH 7.5, aig 70 ℃.
dùmhlachd reagent co-cheangailte: amides, 100 mM (benzamide, 10 mM);hydroxylamine agus hydrazine, 400 mM;enzyme 0.9 μM.
Eisimpleir 2(2):
Eisimpleir 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al.Extremophiles, 2001, 5: 183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR, et al.Bith-cheimigeachd pròiseas, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM, et al.Ceimigeachd Bioorganic, 2017, Ri fhaighinn air-loidhne 7.
